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超凡

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质电泳的缓冲液配置 已有2人参与

SDS-PAGE电泳,电极缓冲液的配置,配方如下(10*):Tris30.2g(0.25摩尔),Gly188g(2.5摩尔),SDS10g(1%),加水溶解,定容至1L。调节ph至8.3。
现在发现电压上不去
此处,若用Tris-HCl替代Tris,会有影响吗?
或者说甘氨酸的质量会对这个产生大影响吗?因为可能试剂有点久。求各路大神好汉告知!

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robertno

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你确定是缓冲溶液的问题?电压上不去有很多原因的。另外,用Tris-HCl替代Tris是什么意思?你用hcl调pH的时候,里面的Tris就变成Tris-HCl了。
试剂放久了确实会有影响
2楼2017-05-26 21:24:38
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拜拜涂

新虫 (小有名气)

3楼2017-05-27 00:34:00
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超凡

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by robertno at 2017-05-26 21:24:38
你确定是缓冲溶液的问题?电压上不去有很多原因的。另外,用Tris-HCl替代Tris是什么意思?你用hcl调pH的时候,里面的Tris就变成Tris-HCl了。
试剂放久了确实会有影响

1.因为刚刚用完的缓冲液能上去,新配的不行,所以首要怀疑缓冲液。
2.按配方,是用tris,后面用HCl调ph,引入的是氯离子。
我因为没有足够tris,用的是Tris-HCl,用NaOH调ph,引入了Na金属离子,不知会不会有影响

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4楼2017-05-27 14:01:17
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超凡

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 拜拜涂 at 2017-05-27 00:34:00
没有吧

哪个没有?用trishcl不影响?还是甘氨酸不影响?求解答,电压上不去很苦恼啊

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5楼2017-05-27 14:02:38
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robertno

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 超凡 at 2017-05-27 14:01:17
1.因为刚刚用完的缓冲液能上去,新配的不行,所以首要怀疑缓冲液。
2.按配方,是用tris,后面用HCl调ph,引入的是氯离子。
我因为没有足够tris,用的是Tris-HCl,用NaOH调ph,引入了Na金属离子,不知会不会有影响
...

引入na离子?这个还真不知道有没有影响,猜测哈,会影响缓冲液的导电性

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6楼2017-05-31 16:49:20
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超凡

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by robertno at 2017-05-31 16:49:20
引入na离子?这个还真不知道有没有影响,猜测哈,会影响缓冲液的导电性
...

感谢

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7楼2017-05-31 20:12:48
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real-times

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这个缓冲液也不用调节pH,用盐酸调节会引入氯离子,影响电泳

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8楼2017-06-02 06:11:56
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real-times

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

用Tris碱,不能用Tris-HCl粉末

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9楼2017-06-02 06:13:28
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qwert呵

新虫 (初入文坛)

tris甘氨酸缓冲液配完不调PH之前PH是8以上吗?
10楼2018-07-30 11:03:05
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