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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 询问荧光分光光度仪使用的问题，谢谢大家指点。
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hanbo82

铁虫 (初入文坛)

[交流] 询问荧光分光光度仪使用的问题，谢谢大家指点。

初学此仪器，有些困惑，还望大家指点迷津：

1 是不是在紫外灯下可以看到荧光的东西就应该能检测出荧光？

2 如果有可能被检测，没有文献的情况下，如何确定最大激发波长？

3 什么原因造成在荧光光谱中激发波长的散射峰前还有一些波长短于激发波长的荧光峰？

4 溶剂有荧光峰我是不是需要换更纯的溶剂？

这些问题困扰了我很长时间，不知道兄弟姐妹能不能给我一点点拨，谢谢！
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1楼 2009-01-11 14:33:35
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孤独的鱼

金虫 (正式写手)
帮不了，还是顶一下
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2楼2009-01-11 17:39:00
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nkton

木虫 (著名写手)
★ ★
wingcat(金币+2,VIP+0):谢谢
荧光全波长扫一遍，就知道最大吸收峰了。
溶剂有吸收没关系，只要是别全部掩蔽就可以了。
一般顺序是带溶剂全扫，用纯溶剂做参比找到最大吸收峰。选定波长，配标液，做标准曲线，进样。
有些年头没做过了，不知说的是否准确。大致流程没有问题。
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3楼2009-01-11 22:28:55
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jack2070

木虫 (著名写手)
★
wingcat(金币+1):谢谢
貌似楼上说的是UV一样？
我的回答：
1. 是的
2. 未知情况下，先以一个比较适中的波长作为发射波长，扫描激发光谱，得到最大激发波长，在该波长下，扫发射光谱，得到最大发射波长，再扫激发光谱，...如此循环，不知明白了不
3. 波长小于激发波长的，肯定不是荧光，如果你是做荧光光谱可以不关注。具体原因我也不太清楚，因为我真的没注意过。是拉曼散射、锐利散射....？
4.不是啊，这种溶剂如果本身就有荧光，那你再纯还是有荧光。如果溶剂的荧光是杂质引起的，当然需要更纯。
OK？？
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平生之志，唯求温饱！
4楼2009-01-12 00:19:54
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hanbo82

铁虫 (初入文坛)
谢谢两位专家虫虫的解答，我见见明白如何用了，
以前实验中没检测出荧光的原因是没有转化激发波长和发射波长，现在搞定了，
呵呵。
再次感谢！
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5楼2009-01-13 14:16:15
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tzcjwp

金虫 (著名写手)
★
wingcat(金币+1):谢谢
也可以用荧光光度计工作站软件系统所带有的3D功能进行确定，这样可能更快些。仅供参考，试试吧！嘿嘿

[ Last edited by tzcjwp on 2009-2-2 at 17:39 ]
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6楼2009-02-02 17:37:28
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