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蘑菇飞

新虫 (正式写手)

[求助] 新手关于wb的操作疑惑 已有1人参与

下面条带有的有黑点点,洗了有3x13min了,应该不是没洗干净的问题。还有第一张条带有一部分直接是白的,不知道哪里出了问题。 我关于剪pvdf膜,我总是不得要领,要么没剪齐,要么大了,大家剪膜的时候是先比着胶,还是直接隔着玻璃板比着剪?, pvdf膜放到甲醇里浸润15s,时间可以长些吗?时间越长,活化正电基团就越多吗?大家有什么建议吗?谢谢了

新手关于wb的操作疑惑


新手关于wb的操作疑惑-1


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504775490

金虫 (知名作家)

用脱脂牛奶封闭可以降低背景,剪膜的时候用尺子铅笔画出线来,祝好~

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4楼2017-05-26 17:58:43
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504775490

金虫 (知名作家)

PVDF膜甲醇中浸泡时间可以久一点,我们一般浸泡90s,做多了发现不用特意计时,二抗室温1h足够了,或者4度2h,二抗也用5%脱脂牛奶配

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5楼2017-05-26 18:01:17
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jiayoubaby

新虫 (小有名气)

封闭时间是多长?还有,你的胶可以做好一点

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2楼2017-05-26 10:24:57
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蘑菇飞

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jiayoubaby at 2017-05-26 10:24:57
封闭时间是多长?还有,你的胶可以做好一点

BSA敷育2h,一抗4℃过夜,二抗90min

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3楼2017-05-26 17:45:21
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拜拜涂

新虫 (小有名气)

6楼2017-05-27 00:34:47
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食品科学2012

铜虫 (小有名气)

背景有小点因为孵育问题,牛奶封闭!二抗可以选择牛奶配,第一张的白色因为你冲了

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7楼2017-05-27 09:08:57
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蘑菇飞

新虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 504775490 at 2017-05-26 18:01:17
PVDF膜甲醇中浸泡时间可以久一点,我们一般浸泡90s,做多了发现不用特意计时,二抗室温1h足够了,或者4度2h,二抗也用5%脱脂牛奶配

我二抗用TBST配的,下次试试BSA,不知道二抗敷育时间长了对结果有什么影响呢?

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8楼2017-05-27 21:44:30
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蘑菇飞

新虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 食品科学2012 at 2017-05-27 09:08:57
背景有小点因为孵育问题,牛奶封闭!二抗可以选择牛奶配,第一张的白色因为你冲了

“第一张的白色因为你冲了”小虫不明白……是打显色液速度太快冲掉了吗?

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9楼2017-05-27 21:50:34
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蘑菇飞

新虫 (正式写手)

谢谢大家的回复,有了你们的陪伴,我会做的更好的。不知道大家回复后是不是自动得金币,不是的话私聊我哦,我对于这些不太明白

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10楼2017-05-27 21:54:10
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