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硫元素

铁虫 (小有名气)

[求助] 用盐作流动相冲洗柱子后压力过高 已有4人参与

各位大神好,我想问一下,用NH4Ac水溶液和NH4Ac乙腈作流动相(分析样品走梯度,开始比例为50:50),分析样品完之后用90:10水:乙腈冲洗柱子30min,然后用90:10乙腈:水再冲洗60min,冲洗完柱子之后,用含盐流动相50:50平衡柱子时,为什么柱压非常高呢?基本都有300多Bar以上了。。。柱子是安捷伦Z0RBAX Eclipse XDB-C18柱。
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硫元素

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 史海君 at 2017-05-23 07:30:04
你先把柱子卸了看看系统压力怎么样,如果还高的话就用水大流速冲,应该是盐析。如果系统没问题的话色谱柱可以先用水小流速冲,如果还不行反过来冲一下然后正用应该就没问题了。
...

用水冲洗柱子过程中压力会平衡下来,故此判断为已经冲洗干净?因为柱子不耐水,所以不敢用水冲洗太久,如果冲洗不干净会再次导致盐析出,所以好纳闷
5楼2017-05-23 21:51:12
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史海君

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你先把柱子卸了看看系统压力怎么样,如果还高的话就用水大流速冲,应该是盐析。如果系统没问题的话色谱柱可以先用水小流速冲,如果还不行反过来冲一下然后正用应该就没问题了。

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2楼2017-05-23 07:30:04
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chuanqi_snk

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先,应该排查一下压力升高的原因,如果有盐析出,应该先冲洗泵头,并用10%的乙腈水冲系统;其次,不清楚你的NH4Ac缓冲盐是多大浓度?通常,缓冲盐的浓度不超过50mmol/L;最后,再次用流动相平衡之前,应该先用10%的乙腈水冲系统30min,否则盐还会析出。
3楼2017-05-23 15:53:07
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硫元素

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chuanqi_snk at 2017-05-23 15:53:07
首先,应该排查一下压力升高的原因,如果有盐析出,应该先冲洗泵头,并用10%的乙腈水冲系统;其次,不清楚你的NH4Ac缓冲盐是多大浓度?通常,缓冲盐的浓度不超过50mmol/L;最后,再次用流动相平衡之前,应该先用10% ...

缓冲液浓度大概是5mmol/L,我用90:10水:乙腈冲洗柱子30min后用90:10乙腈:水冲洗柱子这一步是否会导致盐析出?还是说用90:10水:乙腈冲洗过柱子后,用流动相平衡之前再用90:10乙腈:水去活化柱子会比较好?
4楼2017-05-23 21:48:26
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