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w雨过天晴j

新虫 (初入文坛)

[交流] 提取小鼠肝脏微粒体中蛋白,是不是必须需要提取微粒体才能做western blot分析蛋白表达

想研究的几种蛋白定位于内质网上,是P450家族的,之前做了总蛋白提取,western blot检测有时在对应大小的位置有弱弱的条带,有时又没有,而且抗体杂带又很多,很苦恼,做这方面的检测是不是一定需要先得到微粒体之后再做??看文献里说都要用差速离心法提取,我想知道是不是只有新鲜的组织才可以,冻存的组织还可以提吗?需要多少组织才可以提出可以用于western blot检测的微粒体?
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real-times

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
w雨过天晴j: 金币+1 2017-09-12 08:58:09
看看Pierce公司,最好是分离了细胞器再提取,容易富集。

发自小木虫IOS客户端
2楼2017-05-22 18:31:37
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木子洋奶粉

禁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

3楼2018-05-21 10:43:38
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w雨过天晴j

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 木子洋奶粉 at 2018-05-21 10:43:38
您好, 请问您怎么提的总蛋白啊

直接用SDS裂解的,用98度煮的,有问题吗
4楼2018-06-01 10:01:38
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