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siln506103金虫 (小有名气)
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[交流]
如何使用紫外分光光度计测蛋白质的浓度？
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请问各位大侠：如何使用紫外分光光度计测蛋白质的浓度？我用的是752PC型的紫外分光光度计。谢谢！~~~ [ Last edited by 350784478 on 2009-10-21 at 11:00 ] |
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sutao1979
木虫 (著名写手)
小木虫10年groupleader
- BioEPI: 1
- 应助: 5 (幼儿园)
- 贵宾: 0.694
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- 散金: 150
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- 专业: 植物分类学
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siln506103(金币+5,VIP+0):谢谢，呵呵
siln506103(金币+5,VIP+0):谢谢，呵呵
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以Bradford方法为例，先用标准样品BSA（1-20μg）+800μBradford diluted solution（normal 1：5diluted） 做一个线性标准曲线，要求数值R2在0.99以上；然后取待测的样品大约3μ-5μ（不同蛋白可能取的量不一样，根据经验）+800μ的Bradford diluted solution,然后，放在比色皿里cuvette（一次性的）。 inverting 之后，将mixturein incubate about 5min at room temperature，then detemined at 595nm spectrophotometer，samples were measured as duplicates and triplicates(2-3个重复)，然后把数值（平均值）带入到标准曲线里得出x值，再进行体积换算，就ok了。 用的都是英文的protocol，大概就是这些，我做的样品是拟南芥总蛋白 [ Last edited by sutao1979 on 2009-1-9 at 20:44 ] |
2楼2009-01-09 20:40:29