应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 实时荧光PCR的疑问
221/1返回列表
查看: 1819  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

流云之

银虫 (小有名气)

[交流] 实时荧光PCR的疑问

刚开始使用实时荧光PCR，有几个疑问，希望有道友能够回答：1 探针为什么不能作为引物引起链的延伸？2 taq酶的5'－3'外切酶活性，为什么必须当引物延伸到探针的位置时才能将探针降解？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2017-05-19 15:04:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流云之

银虫 (小有名气)
来人了
回复此楼
2楼2017-05-19 15:37:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

预估预估

新虫 (正式写手)
★
流云之(金币+1): 谢谢参与
看探针法原理。

发自小木虫Android客户端
回复此楼
7楼2017-05-19 17:23:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流云之

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 预估预估 at 2017-05-19 17:23:56
看探针法原理。

原理我看了啊，没有找到问题的原因。层主给指导下呗
赞一下 回复此楼
8楼2017-05-22 09:14:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流云之

银虫 (小有名气)
求大神帮助
回复此楼
11楼2017-07-04 17:22:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
流云之(金币+3): 谢谢参与
流云之: 金币+5 2017-07-10 11:36:13
1 探针为什么不能作为引物引起链的延伸？，因为他被 taq酶降解了。
2 taq酶的5'－3'外切酶活性，为什么必须当引物延伸到探针的位置时才能将探针降解？
其实他是有可以能被酶降解的，只是如果目的片段没扩增的话，它的荧光强度就是，1，2,3,4,5，6,7,8,9,10一个循环一次的增加。
如果目的片段扩增了，就是1，2,4,8,16,32,64,128,526,1052的扩增。
赞一下 回复此楼
14楼2017-07-05 14:19:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流云之

银虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 781055707 at 2017-07-05 14:19:36
1 探针为什么不能作为引物引起链的延伸？，因为他被 taq酶降解了。
2 taq酶的5'－3'外切酶活性，为什么必须当引物延伸到探针的位置时才能将探针降解？
其实他是有可以能被酶降解的，只是如果目的片段没扩增的话， ...

谢谢。还要请问下：1 探针不是被切断，而是被降解了吗？2 TAQ酶只能酶切双链状态的探针吗？
赞一下 回复此楼
19楼2017-07-10 11:38:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yumao8510

木虫 (小有名气)
★
流云之(金币+3): 谢谢参与
其实探针是切断而发荧光的，探针先结合上去被Taq酶切断后才发荧光

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
20楼2017-07-10 14:19:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流云之

银虫 (小有名气)
引用回帖:
20楼: Originally posted by yumao8510 at 2017-07-10 14:19:29
其实探针是切断而发荧光的，探针先结合上去被Taq酶切断后才发荧光

也就是说Taq酶只能切断双链状态的探针了？
赞一下 回复此楼
21楼2017-07-12 10:08:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
流云之3楼
2017-05-19 16:08   回复  
gengxin604楼
2017-05-19 16:12   回复  
流云之(金币+1): 谢谢参与
祝福
美亿美生物5楼
2017-05-19 16:15   回复  
流云之(金币+1): 谢谢参与
祝福?? 发自小木虫IOS客户端
流云之6楼
2017-05-19 16:32   回复  
引用回帖:
4楼: Originally posted by gengxin60 at 2017-05-19 16:12:15 祝福

流云之9楼
2017-05-22 11:27   回复  
8
流云之10楼
2017-05-22 15:29   回复  
9
流云之12楼
2017-07-04 19:01   回复  
流云之13楼
2017-07-05 11:30   回复  
13
流云之15楼
2017-07-05 14:39   回复  
14
wdxmu16楼
2017-07-05 20:54   回复  
流云之(金币+3): 谢谢参与
一 发自小木虫IOS客户端
nono200917楼
2017-07-05 21:06   回复  
·
流云之18楼
2017-07-07 14:28   回复  
17
流云之22楼
2017-07-20 09:02   回复  
22
相关版块跳转 我要订阅楼主 流云之 的主题更新
221/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭