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蛋白采用饱和硫酸铵以及正辛酸法纯化透析后,浓度相差10倍是什么原因引起?
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| 请教给位前辈,最近在做蛋白纯化,采用两步法 (饱和硫酸铵+正辛酸 )测定蛋白浓度是透析前浓度在2mg/ml,但是透析后测定蛋白浓度为0.285mg/ml相差很大,他人怀疑过是透析袋漏液,我重复了3次实验,实验的结果是一样的,而且我一直不认为是透析袋的原因,最近新买的透析袋,截留分子量为14KD,\与前面用的透析袋一样的截留量,透析前后的体积并没有显著的改变,基本上没有发生变化,若是漏掉透析液中,由于本身蛋白不是很高的浓度,透析液的蛋白也是被稀释了,基本无。请教给位前辈指导是何原因导致?谢谢! |
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