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ljp7786

铜虫 (初入文坛)

[交流] 酶切鉴定重组质粒载体片段变小了

构建重组质粒,载体双酶切后电泳大小正确,切胶回收。目的基因片段双酶切切胶回收后与胶回收载体连接,通过PCR筛到阳性克隆后,提取阳性克隆质粒,在进行双酶切鉴定,结果总是目的基因也能酶切下来,但是载体片段变小了,而且是从10kb变成3kb,重新划线提取载体质粒酶切回收还是同一结果,实验室其他人也在这个载体上出现这个问题,百思不得其解,帮忙分析一下,谢谢!

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