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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 网络生活区 » 有奖问答 » 学术帮助 » UPLC做尿液中肌酐的标曲，能高浓度的点线性总是不好
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changchunwan

木虫 (小有名气)

[求助] UPLC做尿液中肌酐的标曲，能高浓度的点线性总是不好

求助：在用UPLC做尿液中肌酐的标曲，小浓度的点（1ug/ml,2ug/ml，5ug/ml,8ug/ml,10ug/ml,25ug/ml,50ug/ml,100ug/ml,200ug/ml，400ug/ml）做出的标曲R^2能达到三个9以上；大浓度的点（800ug/ml,1000ug/ml,1600ug/ml,2000ug/ml）所成曲线R值达不到要求，0.98左右。而且我也做过整个从1到2000ug/ml的曲线，R值同样达不到要求。之前是浓度高基线漂，积分不准确，我更换了波长，低浓度的点线性依然好，高浓度跑的峰已经挺好了，基线很平了，问题依然存在。
老师说可能高浓度的点超出了线性范围，可是我很想知道为什么，就是什么原因造成的高浓度线性不好呢？
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1楼 2017-05-18 16:06:03
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clwyth

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
changchunwan: 金币+15, 博学EPI+1, ★★★很有帮助 2017-05-18 18:07:24
高浓度的点，谱图有点饱和了，色谱峰虽然没有平头，但是色谱柱的吸附能力是有一定量的，你的浓度跨度都有2000倍了，对仪器，对色谱柱都不好，仪器容易有残留，建议在满足分析条件下，进少量样品以及进低浓度样品，对仪器和色谱柱都能起到保护作用。
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为爱自己和自己爱的人努力吧！！
2楼2017-05-18 16:37:14
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changchunwan

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by clwyth at 2017-05-18 16:37:14
高浓度的点，谱图有点饱和了，色谱峰虽然没有平头，但是色谱柱的吸附能力是有一定量的，你的浓度跨度都有2000倍了，对仪器，对色谱柱都不好，仪器容易有残留，建议在满足分析条件下，进少量样品以及进低浓度样品，对 ...

谢谢~非常感谢您~您觉得波长对含量测定有影响吗，我做肌酐它的最大吸收波长在230nm，我用245nm做低浓度的线性也很好，就是不知道对样品中肌酐有没有影响呢

发自小木虫IOS客户端
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3楼2017-05-18 16:46:13
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clwyth

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by changchunwan at 2017-05-18 16:46:13
谢谢~非常感谢您~您觉得波长对含量测定有影响吗，我做肌酐它的最大吸收波长在230nm，我用245nm做低浓度的线性也很好，就是不知道对样品中肌酐有没有影响呢
...

最大吸收波长在230 nm，这个波长对很多物质来说可能都会有吸收，干扰可能会出现，如果245 nm线性也很好的话，可以用的。样品中肌酐前处理如果干净彻底，是不会有影响的。对于样品中肌酐来说，如何把前处理做好才是关键。对任何物质的提取关键都在前处理，前期的方法建立只是一个辅助手段而已，不要浪费太多时间去琢磨标线是2个9还是3个9.
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4楼2017-05-19 09:07:39
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