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新虫 (初入文坛)

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[交流] 二代测序问题已有3人参与

请问，二代测序没有一代sanger测序的片段长，那怎么做到比一代高的高通量呢？谢谢！

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1楼 2017-05-18 09:39:23

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kanqi123

新虫 (小有名气)

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-19 07:42:55

以illumina为例，DNA首先被打断成一个一个的片段，然后末端修复，再加上测序接头，我们把这种加上接头的DNA分子称为文库，之后将DNA文库“种”到flowcell上，进行桥式PCR，这样每一个文库分子就会被扩增很多倍，所以测序的时候每一个碱基都会读很多次，所以叫高通量。而一代测序虽然读长较二代长，但是他的每一个碱基只会读一次。

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2楼2017-05-18 19:14:13

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低调5238

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高通量就是大规模平行测序的意思，每个碱基可以测多次

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3楼2017-05-18 22:17:28

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602059625

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引用回帖:

2楼: Originally posted by kanqi123 at 2017-05-18 19:14:13
以illumina为例，DNA首先被打断成一个一个的片段，然后末端修复，再加上测序接头，我们把这种加上接头的DNA分子称为文库，之后将DNA文库“种”到flowcell上，进行桥式PCR，这样每一个文库分子就会被扩增很多倍，所以 ...

并没有说到点上
sanger测序，测一条序列需要一根毛细管
二代测序，测一条序列只要一个点，几平方毫米的面积里就能得到上百万条序列

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