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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 工艺技术 » 版块活动 » 怕氧的酶的纯化问题
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wf19911116

新虫 (初入文坛)

[求助] 怕氧的酶的纯化问题 已有1人参与

请问我的酶易被氧气氧化  我该怎么纯化？
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1楼 2017-05-16 15:03:47
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F翔T

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
所有的buffer都加上DTT或β-巯基乙醇，最好能在4度冷室里面完成所有操作。用的时候buffer冲上氮气，把氧气都赶出来。
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2楼2017-05-18 23:23:25
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wf19911116

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by F翔T at 2017-05-18 16:23:25
所有的buffer都加上DTT或β-巯基乙醇，最好能在4度冷室里面完成所有操作。用的时候buffer冲上氮气，把氧气都赶出来。

DTT对镍柱有损害  而且纯化怎么保证在4℃？

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3楼2017-05-23 09:47:24
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F翔T

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wf19911116 at 2017-05-23 09:47:24
DTT对镍柱有损害  而且纯化怎么保证在4℃？
...

那就加贝塔巯基以纯，我的蛋白很容易氧化，我一般都在4度冷室里做，没有的话时时不离冰试一试

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4楼2017-05-25 20:45:53
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