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qswzlf0809

[交流] 求助,我的HUVEC为什么都死掉了?

请教各位前辈,请帮我分析一下HUVEC死亡原因好吗?
情况是这样,我的传代HUVEC从别人处拿回后,用含20%小牛血清M199第一次传代,细胞长的不错,就是快了些,48小时用15%小牛血清M199传第二代,可细胞生长直线下降,换液也不行,最后都死掉了。自己仔细想想,是第二次传代消化时间过长(约1分钟),因为当时发现有细胞已经飘起来了,还是传代间隔时间太短造成的?或者还有其他原因?好困惑好郁闷啊,请各位前辈指点迷津,要不这个年过不好了。
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~~
这个细胞比较难养,一般用的是20%小牛血清DMEM培养基。含谷氨酰胺。细化时细胞收缩変圆变亮即可,吸走酶,加完全培养基终止培养,再吸走完全培养基,加完全培养基轻轻吹打直至脱壁即可。
2楼2009-01-09 11:52:29
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