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张小蛋

新虫 (小有名气)

[求助] 在大肠枯草中均能高效表达的氯霉素基因

最近在做大肠枯草的基因敲除,哪位大神知道大肠枯草中均能高效表达的氯霉素基因??还有就是大家枯草转化敲除过程中是否出现了卡纳极高假阳性的问题,大家相互交流呦

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szp0401

木虫 (正式写手)

枯草卡纳假阳性并不高,除非你的菌对卡纳不敏感,大肠和枯草里面的氯霉素基因序列不一样

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3楼2017-05-15 11:50:55
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szp0401

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 张小蛋 at 2017-05-15 12:00:46
请问您是都知道在大肠枯草里都能应用的氯霉素基因呢?我的菌是WB 800自己WB 800N 是不是这两个对卡纳极其敏感呢??
...

WB800肯定敏感,至于你说的WB800N我不知道是否敏感。

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6楼2017-05-15 13:15:23
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张小蛋

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by szp0401 at 2017-05-15 13:15:23
WB800肯定敏感,至于你说的WB800N我不知道是否敏感。
...

但是我们应用了很多转化方法,只有将板上抗性提高到平时应用浓度接近两倍,才能得到阳性克隆,可能真是抗生素纯度问题了

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9楼2017-05-15 13:21:49
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张小蛋

新虫 (小有名气)

2楼2017-05-15 11:49:21
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张小蛋

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by szp0401 at 2017-05-15 11:50:55
枯草卡纳假阳性并不高,除非你的菌对卡纳不敏感,大肠和枯草里面的氯霉素基因序列不一样

请问您是都知道在大肠枯草里都能应用的氯霉素基因呢?我的菌是WB 800自己WB 800N 是不是这两个对卡纳极其敏感呢??

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4楼2017-05-15 12:00:46
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张小蛋

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 张小蛋 at 2017-05-15 12:00:46
请问您是都知道在大肠枯草里都能应用的氯霉素基因呢?我的菌是WB 800自己WB 800N 是不是这两个对卡纳极其敏感呢??
...

不对,表述有问题,是极其不敏感??望指教

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5楼2017-05-15 12:01:30
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szp0401

木虫 (正式写手)

至于你说的都能应用的氯霉素基因我不知道是否有

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7楼2017-05-15 13:16:20
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张小蛋

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by szp0401 at 2017-05-15 13:16:20
至于你说的都能应用的氯霉素基因我不知道是否有

感谢,感谢

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8楼2017-05-15 13:18:37
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szp0401

木虫 (正式写手)

10楼2017-05-15 13:41:52
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