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yudaoqian88至尊木虫 (知名作家)
不良人
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[交流]
pGREEN2-0800-LUC载体是否适合农杆菌GV3101
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我们将pSOUP辅助质粒转入GV3101，长斑倒是正常的，但无法在10mg/L正常浓度的四环素抗性液体培养基中上生长，不知道是什么原因，一位做过这个实验的同学说需要共转化。今天仔细看了文献，指明可以共转，也可以分两步转化。但在描述合适的菌株时未说明常用的GV3101能否使用，我们在查阅文献方法时，发现多数的研究者利用该载体也都是用的GV3101，特来求助。文献摘取如下： 文献信息如下： Plant Molecular Biology42:819–832,2000.©2000KluwerAcademicPublishers.PrintedintheNetherlands.819 pGreen: a versatile and fexible binary Ti vector for Agrobacterium-mediated plant transformation RogerP.Hellens,E.AnneEdwards,NicolaR.Leyland,SamanthaBeanandPhilipM.MullineauxJohnInnesCentre,NorwichResearchPark,Colney,Norwich,NR47UH,UK(authorforcorrespondence;e-mail:hellens@bbsrc.ac.uk;fax:C441603456844)Received8June1999;acceptedinrevisedform30January2000 Keywords: Agrobacterium ,binaryvectors, planttransformation, reportergenes, selectable markergenes, Ti vector 关于转化部分的描述如下： The pGreen and pSoup plasmids (Figure1) can be used in a mixed electroporation. Inthisinstance, selection for co-transformed Agrobacterium can be achieved using kanamycin-containing medium only, since pGreen can not replicate in Agrobacterium without pSoup being co-resident. Alternatively, electro-competent Agrobacterium containing the pSoup can be generated, by selection for tetracycline resistance, and subsequently re-electroporated with pGreen and selection for kanamycin-resistant colonies: A.tumefaciens strains LBA4404, GV2260, GV3280, AGL-1 and EHA105 and A .rhizogenes strain LBA9402 support pGreen/pSoup replication. |
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9楼2021-09-15 21:09:56
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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请问psoup可以单转大肠杆菌DH5α吗？转的话tet浓度是多少？ps:我们都是和pgreen共转农杆菌gv3101只加kana抗性，不加tet。希望能帮到你。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2017-07-20 09:09:59
yudaoqian88
至尊木虫 (知名作家)
不良人
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3楼2017-07-20 10:43:00
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40