| 查看: 7951 | 回复: 10 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
yudaoqian88至尊木虫 (知名作家)
不良人
|
[交流]
pGREEN2-0800-LUC载体是否适合农杆菌GV3101
|
||
|
我们将pSOUP辅助质粒转入GV3101，长斑倒是正常的，但无法在10mg/L正常浓度的四环素抗性液体培养基中上生长，不知道是什么原因，一位做过这个实验的同学说需要共转化。今天仔细看了文献，指明可以共转，也可以分两步转化。但在描述合适的菌株时未说明常用的GV3101能否使用，我们在查阅文献方法时，发现多数的研究者利用该载体也都是用的GV3101，特来求助。文献摘取如下： 文献信息如下： Plant Molecular Biology42:819–832,2000.©2000KluwerAcademicPublishers.PrintedintheNetherlands.819 pGreen: a versatile and fexible binary Ti vector for Agrobacterium-mediated plant transformation RogerP.Hellens,E.AnneEdwards,NicolaR.Leyland,SamanthaBeanandPhilipM.MullineauxJohnInnesCentre,NorwichResearchPark,Colney,Norwich,NR47UH,UK(authorforcorrespondence;e-mail:hellens@bbsrc.ac.uk;fax:C441603456844)Received8June1999;acceptedinrevisedform30January2000 Keywords: Agrobacterium ,binaryvectors, planttransformation, reportergenes, selectable markergenes, Ti vector 关于转化部分的描述如下： The pGreen and pSoup plasmids (Figure1) can be used in a mixed electroporation. Inthisinstance, selection for co-transformed Agrobacterium can be achieved using kanamycin-containing medium only, since pGreen can not replicate in Agrobacterium without pSoup being co-resident. Alternatively, electro-competent Agrobacterium containing the pSoup can be generated, by selection for tetracycline resistance, and subsequently re-electroporated with pGreen and selection for kanamycin-resistant colonies: A.tumefaciens strains LBA4404, GV2260, GV3280, AGL-1 and EHA105 and A .rhizogenes strain LBA9402 support pGreen/pSoup replication. |
回复此楼» 猜你喜欢
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有79人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
7楼2021-09-09 08:55:20
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
请问psoup可以单转大肠杆菌DH5α吗？转的话tet浓度是多少？ps:我们都是和pgreen共转农杆菌gv3101只加kana抗性，不加tet。希望能帮到你。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2017-07-20 09:09:59
yudaoqian88
至尊木虫 (知名作家)
不良人
- MolEPI: 1
- 应助: 67 (初中生)
- 金币: 27182.3
- 散金: 412
- 红花: 34
- 沙发: 15
- 帖子: 8129
- 在线: 977.2小时
- 虫号: 1430329
- 注册: 2011-10-07
- 性别: GG
- 专业: 作物种质资源与遗传育种学
3楼2017-07-20 10:43:00
4楼2018-04-23 16:59:31