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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 纯化蛋白求助
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米饭粒

铜虫 (小有名气)

[交流] 纯化蛋白求助

本人克隆表达一个蛋白在BL21，前几次诱导纯化很好，后来再也重复不出来了，超声后全菌体有蛋白，离心取上清蛋白就没了，变成不可溶了，诱导时间6h，温度30℃，IPTG浓度1mM，重复了几次没做出来。后来改变时间改变温度，诱导剂浓度都没有再出来蛋白。求助各位大神，小女子必有重谢

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1楼 2017-05-12 15:18:21
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歪果仁shu

新虫 (小有名气)
破细胞不充分？

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2楼2017-05-13 14:00:26
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397608492

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以适当降低诱导温度或者IPTG浓度

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3楼2017-05-13 16:58:05
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风信子2000

捐助贵宾 (小有名气)
求助师兄师姐吧
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4楼2017-05-13 17:05:38
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