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绿松石6727

新虫 (小有名气)

[交流] H is标签蛋白纯化

我现在纯化His标签蛋白,但是在最后一步用咪唑洗脱目的蛋白的时候,总是出现这种情况,洗脱下来的蛋白浓度大概在0.2mg/ml左右,但是洗脱了很久,浓度还是一直是这个浓度,就是感觉一直有,洗不干净似的。我用的洗脱缓冲液中咪唑浓度为500mM。但是问题是几十毫升的洗脱液用超滤离心管浓缩成一两毫升后,浓度也还是0.2mg/ml左右,不知道为什么浓度没有变化?做了两个不同的蛋白,出现的情况是一样的。有大神能帮忙分析一下吗?不胜感激!

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