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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶纯化
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fm707755

金虫 (小有名气)

[交流] 酶纯化


菌株:根霉

破碎方法                上清                                沉淀

研磨                      无酶活                           无酶活

超声波                    无酶活                          有酶活

甘氨酸渗透             无酶活                            有酶活   


破碎效果判断:研磨,镜检;超声波,甘氨酸渗透 ,上清测260nm,280nm紫外吸收(都有很强吸收)

我的理解为目的酶是膜蛋白,磨碎后,膜被破坏,酶结构改变,失活,超声和渗透后,菌丝骨架看起来还完整,膜可能没坏,因此酶活还在.


请问:我这样理解合不合适?

另外,根据文献资料,推测目的酶可能是糖基转移或糖苷合成类酶如果要进行BLAST,(想知道根霉里是否存在糖基转移酶或糖苷合成酶这两类酶),该如何操作,小弟生物信息基础比较差

[ Last edited by fm707755 on 2009-1-8 at 11:27 ]
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1楼 2009-01-08 11:22:48
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charon1982

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
fm707755(金币+2,VIP+0):感谢参与
也有可能你研磨过程，操作有问题，排除了吗
赞一下(4人) 回复此楼
帮助虫友，提升自己
2楼2009-01-08 12:06:09
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fm707755

金虫 (小有名气)
研磨过程是没有问题的，低温，也试过N种保护剂。系列pH值。
赞一下 回复此楼
3楼2009-01-08 13:39:04
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HDLWH

木虫 (正式写手)
★
fm707755(金币+1,VIP+0):谢谢帮顶!看贴帮顶是好水品!
友情帮顶
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4楼2009-01-08 15:20:39
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dochy

木虫 (小有名气)
★
fm707755(金币+1,VIP+0):谢谢帮顶!看贴帮顶是好水品!
好像膜蛋白提取是比较困难的，我对真菌也不是很懂，帮你顶一下吧~~~~
赞一下(3人) 回复此楼
5楼2009-01-08 16:12:48
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zhhl2981

木虫 (职业作家)
★
fm707755(金币+1,VIP+0):谢谢，我试一下。
建议调整一下超声功率和时间，这样可获得理想的效果
赞一下(3人) 回复此楼
6楼2009-01-08 19:36:47
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