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日落沙发

新虫 (小有名气)

[求助] 制作大肠杆菌染色体上一个碱基突变

最近在做大肠杆菌染色体一个碱基突变。
第一步电击将带有kan和ccdb基因的一个片段电击染色体,在有抗生素的盘上筛选后,再在有相同抗生素的盘纯化,在rhamnose盘上筛选对ccdb sensitive的菌种。
我现在遇到的问题是,电击后有菌点在盘上长出,纯化也有点长出,但始终rhamnose盘上始终有点长出,即对rhamnose始终不sensitive。
求教,各位大神,这是为什么?
~~~

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