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不懂要学习

新虫 (初入文坛)

[求助] 柱子大小选择,求助急。。。。。已有1人参与

本人研一第一次接触蛋白质提取实验,16.9KD的肌红蛋白提取纯化用g75凝胶层析柱选多长大小的柱子适合呢?

@cgjlove @xiaoamuchong @lovibond @hackfeng0 发自小木虫Android客户端
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w911227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
分级分离时,一般需要100cm左右长的层析柱,柱高与直径之比为20:1-100:1,柱高过高的话凝胶容易挤压变形阻塞,会引起较大的反压,应当尽量避免。分组分离(例如脱盐)时用短柱,柱高控制在40-50cm以下,柱高与直径的比约为5:1-10:1.
其实这个没有什么硬性的规定,可以根据自己实验室的条件挑选差不多的就可以了。

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苦难的日子终将逝去,但强者却永存
2楼2017-05-09 15:12:45
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不懂要学习

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by w911227 at 2017-05-09 15:12:45
分级分离时,一般需要100cm左右长的层析柱,柱高与直径之比为20:1-100:1,柱高过高的话凝胶容易挤压变形阻塞,会引起较大的反压,应当尽量避免。分组分离(例如脱盐)时用短柱,柱高控制在40-50cm以下,柱高与直径的 ...

感谢!

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3楼2017-05-10 11:58:37
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不懂要学习

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by w911227 at 2017-05-09 15:12:45
分级分离时,一般需要100cm左右长的层析柱,柱高与直径之比为20:1-100:1,柱高过高的话凝胶容易挤压变形阻塞,会引起较大的反压,应当尽量避免。分组分离(例如脱盐)时用短柱,柱高控制在40-50cm以下,柱高与直径的 ...

葡聚糖凝胶是用水溶胀还是用洗脱液溶胀好呢?

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4楼2017-05-10 13:04:11
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w911227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 不懂要学习 at 2017-05-10 13:04:11
葡聚糖凝胶是用水溶胀还是用洗脱液溶胀好呢?
...

干粉的话浸泡于蒸馏水中至少24h,并不断搅拌,或用蒸馏水煮沸至少1h,直至凝胶体积不再变化。在溶胀前,加入蒸馏水搅拌后使其自然沉降,沉降后若上层溶液中有漂浮的凝胶碎片颗粒较多,需要多次洗涤将其除去,不然会造成阻塞。
苦难的日子终将逝去,但强者却永存
5楼2017-05-10 16:25:02
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weitaiyan

铜虫 (著名写手)

PTFE多孔材料的蛋白质层析板可以过滤混合后沉淀的蛋白质,并且避免堵塞,破碎或乙腈等有机溶剂泄漏,这种过滤介质可替代耗时的离心和转移步骤。
www.spider-amoy.com
6楼2019-03-09 08:31:33
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