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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 水产品、畜产品 » 柱子大小选择，求助急。。。。。
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不懂要学习

新虫 (初入文坛)

[求助] 柱子大小选择，求助急。。。。。 已有1人参与

本人研一第一次接触蛋白质提取实验，16.9KD的肌红蛋白提取纯化用g75凝胶层析柱选多长大小的柱子适合呢？

@cgjlove @xiaoamuchong @lovibond @hackfeng0 发自小木虫Android客户端
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1楼 2017-05-08 19:18:24
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w911227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
分级分离时，一般需要100cm左右长的层析柱，柱高与直径之比为20:1-100:1，柱高过高的话凝胶容易挤压变形阻塞，会引起较大的反压，应当尽量避免。分组分离（例如脱盐）时用短柱，柱高控制在40-50cm以下，柱高与直径的比约为5:1-10:1.
其实这个没有什么硬性的规定，可以根据自己实验室的条件挑选差不多的就可以了。
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不懂要学习
苦难的日子终将逝去，但强者却永存
2楼2017-05-09 15:12:45
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不懂要学习

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by w911227 at 2017-05-09 15:12:45
分级分离时，一般需要100cm左右长的层析柱，柱高与直径之比为20:1-100:1，柱高过高的话凝胶容易挤压变形阻塞，会引起较大的反压，应当尽量避免。分组分离（例如脱盐）时用短柱，柱高控制在40-50cm以下，柱高与直径的 ...

感谢！

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3楼2017-05-10 11:58:37
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不懂要学习

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by w911227 at 2017-05-09 15:12:45
分级分离时，一般需要100cm左右长的层析柱，柱高与直径之比为20:1-100:1，柱高过高的话凝胶容易挤压变形阻塞，会引起较大的反压，应当尽量避免。分组分离（例如脱盐）时用短柱，柱高控制在40-50cm以下，柱高与直径的 ...

葡聚糖凝胶是用水溶胀还是用洗脱液溶胀好呢？

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4楼2017-05-10 13:04:11
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w911227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 不懂要学习 at 2017-05-10 13:04:11
葡聚糖凝胶是用水溶胀还是用洗脱液溶胀好呢？
...

干粉的话浸泡于蒸馏水中至少24h,并不断搅拌，或用蒸馏水煮沸至少1h,直至凝胶体积不再变化。在溶胀前，加入蒸馏水搅拌后使其自然沉降，沉降后若上层溶液中有漂浮的凝胶碎片颗粒较多，需要多次洗涤将其除去，不然会造成阻塞。
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苦难的日子终将逝去，但强者却永存
5楼2017-05-10 16:25:02
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weitaiyan

铜虫 (著名写手)
PTFE多孔材料的蛋白质层析板可以过滤混合后沉淀的蛋白质，并且避免堵塞，破碎或乙腈等有机溶剂泄漏，这种过滤介质可替代耗时的离心和转移步骤。
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www.spider-amoy.com
6楼2019-03-09 08:31:33
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