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倩倩姚

新虫 (初入文坛)

[求助] QPCr溶解曲线已有2人参与

溶解曲线前半部分是样品的,后面曲线是标准品的,前面起了一个小峰,是不是存在非特异扩增,有引物二聚体呀?

QPCr溶解曲线


QPCr溶解曲线-1


@biostar2009 发自小木虫Android客户端
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还是小号

新虫 (小有名气)

请问,您的溶解曲线中质粒和样品的出峰位置不一样,请问你是怎么样解决的呢

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5楼2018-07-22 22:20:25
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stabilized

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-08 21:10:45
我认为是非特异性扩增产物,建议跑胶看看,一般没有太大问题。一般都会有一点小峰。
不过,重新设计引物倒不一定需要,可以考虑再提高温度试试,还可以适当降低引物浓度。
坚持!
2楼2017-05-08 16:13:25
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大东红日

木虫 (正式写手)

样品和标准品的峰不重叠??

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3楼2017-05-09 08:59:17
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米粒--YA

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我之前买的是菩禾生物的RT-qPCR试剂盒,他们公司试剂盒提供引物,而且引物是经过多次试验验证的,不会出现像你这样溶解曲线有两个峰
4楼2017-05-16 08:56:31
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