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任逍遥010

银虫 (小有名气)

[交流] 包涵体超声后沉淀很少,而且是黑色的

包涵体超声后沉淀很少,而且是黑色的不知道怎么回事?求高手帮忙!!谢了

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-8 at 09:05 ]
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来!
破菌效率
2楼2009-01-07 19:43:43
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wangzhiyun

铜虫 (初入文坛)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来!
黑色的多半是破菌过头了造成的
3楼2009-01-08 10:20:52
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二等功

铜虫 (初入文坛)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来!
黑色是因为功率太大了
4楼2009-01-14 22:40:36
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jasco

木虫 (正式写手)


lwf991229(金币+1):3Q~感谢参与讨论~ 1-18 18:39
包涵体为什么还超声?
是菌体超声后沉淀少吧?你确定蛋白是包涵体表达么?
黑了是超过头的原因,蛋白碳化
5楼2009-01-15 11:06:06
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zswx1

最近我也在做超声破碎,效果也不太好,离心后沉淀无法重悬
黑了,可能是时间长了,或者探头碰到管壁了
6楼2009-01-15 13:27:49
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cooldog520

铜虫 (初入文坛)

是的 我也遇到了 可以理解为烧焦了吗?
7楼2009-01-18 16:55:24
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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲


lwf991229(金币+1):欢迎常来生物版~ 1-19 00:42
1、量少——
     适当延长培养时间,多量表达。
2、黑色、褐色等——
     一般为超声功率过大或者温度降低不够导致。在冰上操作的效果并不好,可以考虑在冰水混合物冷却中超声,并且注意超声时间!
8楼2009-01-18 20:38:50
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gr0613

铁虫 (初入文坛)


lwf991229(金币+1):欢迎常来生物版~ 1-19 00:42
黑色属于正常现象
超破时要用冰水混合物冷却外围,以致不会形成温度过高而将蛋白碳化。
9楼2009-01-18 23:20:21
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shenqicc

金虫 (小有名气)

超声后沉淀很少,有时也是正常的,如短时多次的破碎方式,最终破壁效果可能甚至达到比较澄清,至于管底部有黑色,可能是由于破碎过了的原因,注意破碎不要连续较长时间,注意及时添加冰水
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10楼2009-01-19 01:36:10
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