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芽芽呢

新虫 (初入文坛)

[求助] qRT-PCR教学 已有1人参与

刚刚开始做qRT，对这些知识一无所知，有没有大神可以推荐什么全面的教学？

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1楼 2017-05-05 20:01:00
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zzzzzzz830

新虫 (初入文坛)
多看文献

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2楼2017-05-06 01:06:35
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颜紫星

新虫 (著名写手)
1.提取rna，测其浓度
2.以rna为模板，逆转录为cdna
3.以cdna为模板，进行pcr
4.以pcr产物为模板进行二次pcr
基本流程就是这样希望对楼主有用

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3楼2017-05-08 10:17:21
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bio转录组

金虫 (正式写手)
首先看一下分子生物学课本，研究一下基础知识。
然后具体做法其实很简单，没什么困难的
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生活活生生累死
4楼2017-05-08 12:30:29
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预估预估

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 颜紫星 at 2017-05-08 10:17:21
1.提取rna，测其浓度
2.以rna为模板，逆转录为cdna
3.以cdna为模板，进行pcr
4.以pcr产物为模板进行二次pcr
基本流程就是这样希望对楼主有用

请问，为什么要测RNA浓度呢？

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我就是我，我就是人间不一样的烟火。
5楼2017-05-08 13:31:08
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hx814102

新虫 (正式写手)
很简单、百度就有原理、方法、操作

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Everydayisanewday!
6楼2017-05-08 22:57:20
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stabilized

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

首先要弄清楚所有名词：熔解曲线、基线、扩增曲线等好多，需要查一下。
再弄懂qPCR原理（不需要会计算，大体明白就行），这个百度上面有。
然后学会看图：熔解曲线、扩增曲线等。
最后学一下仪器设置，实验（加样、体系等），可以从文献方法中获取。
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坚持！
7楼2017-05-09 09:47:20
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