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芽芽呢

新虫 (初入文坛)

[求助] qRT-PCR教学 已有1人参与

刚刚开始做qRT,对这些知识一无所知,有没有大神可以推荐什么全面的教学?

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zzzzzzz830

新虫 (初入文坛)

2楼2017-05-06 01:06:35
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颜紫星

新虫 (著名写手)

1.提取rna,测其浓度
2.以rna为模板,逆转录为cdna
3.以cdna为模板,进行pcr
4.以pcr产物为模板进行二次pcr
基本流程就是这样希望对楼主有用

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3楼2017-05-08 10:17:21
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bio转录组

金虫 (正式写手)

首先看一下分子生物学课本,研究一下基础知识。
然后具体做法其实很简单,没什么困难的
生活活生生累死
4楼2017-05-08 12:30:29
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预估预估

新虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 颜紫星 at 2017-05-08 10:17:21
1.提取rna,测其浓度
2.以rna为模板,逆转录为cdna
3.以cdna为模板,进行pcr
4.以pcr产物为模板进行二次pcr
基本流程就是这样希望对楼主有用

请问,为什么要测RNA浓度呢?

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5楼2017-05-08 13:31:08
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hx814102

新虫 (正式写手)

很简单、百度就有原理、方法、操作

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Everydayisanewday!
6楼2017-05-08 22:57:20
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stabilized

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

首先要弄清楚所有名词:熔解曲线、基线、扩增曲线等好多,需要查一下。
再弄懂qPCR原理(不需要会计算,大体明白就行),这个百度上面有。
然后学会看图:熔解曲线、扩增曲线等。
最后学一下仪器设置,实验(加样、体系等),可以从文献方法中获取。
坚持!
7楼2017-05-09 09:47:20
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