应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » RT-PCR
201/1返回列表
查看: 1791  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

合欢雨意

银虫 (小有名气)

[交流] RT-PCR

各位好：
       我现在在提取RNA，请问做RT_PCR时进行cDNA的合成前必须要知道RNA的浓度吗？看到有人在做A260，A280，A230， 要求A260介于0.1和1.0，A260/A280介于1.8-2.0，A260/A230大于1.7。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2017-05-04 16:51:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

如烟2005

新虫 (初入文坛)
★ ★
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-07 22:22:46
引用回帖:
1楼: Originally posted by 合欢雨意 at 2017-05-04 16:51:52
各位好：
       我现在在提取RNA，请问做RT_PCR时进行cDNA的合成前必须要知道RNA的浓度吗？看到有人在做A260，A280，A230， 要求A260介于0.1和1.0，A260/A280介于1.8-2.0，A260/A230大于1.7。

必须测RNA浓度，取不同处理样品相同量的RNA反转录为cDNA，以保证模板浓度比较接近，我是这样理解的有 希望有帮助。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2017-05-04 19:12:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

合欢花的忧伤

新虫 (著名写手)
★
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
那是测质量的，大哥

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
2楼2017-05-04 17:28:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

研海一鲸

银虫 (小有名气)
★ ★
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-05 16:15:51
1.RT试剂盒有有效浓度范围规定，RT反应最高值为几千ng/微升不等，可参考说明书。
2.测量260/280等数值是方便参考RNA纯度，一般希望无DNA或蛋白污染，越纯越好。
3.增加测量步骤，可以统一最终cDNA浓度，做一个半定量检测。
赞一下 回复此楼
5楼2017-05-04 19:30:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yumao8510

木虫 (小有名气)
★
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
定性的话可以不测

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2017-05-07 14:43:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

欢喵

新虫 (小有名气)
★
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
1楼: Originally posted by 合欢雨意 at 2017-05-04 16:51:52
各位好：
       我现在在提取RNA，请问做RT_PCR时进行cDNA的合成前必须要知道RNA的浓度吗？看到有人在做A260，A280，A230， 要求A260介于0.1和1.0，A260/A280介于1.8-2.0，A260/A230大于1.7。

要测一下的，万一你的RNA就没提出来呢，或者提的质量差呢

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
11楼2017-05-09 20:04:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bye1

新虫 (初入文坛)
★
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
测啊，逆转录的模板量最好控制在试剂盒要求的范围内，也就几分钟的事

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
15楼2017-11-15 11:10:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红嘴相思鸟

新虫 (初入文坛)
★
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
需要测

发自小木虫Android客户端
回复此楼
16楼2017-11-15 11:15:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

拿下英语

金虫 (著名写手)
★
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
protocol有推荐浓度，用于反转录的rna一般为300ng

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
18楼2018-05-30 19:28:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
syhorchid4楼
2017-05-04 19:26   回复  
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
tzynew6楼
2017-05-04 20:01   回复  
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
slytjiaofei7楼
2017-05-04 20:21   回复  
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
15861655328楼
2017-05-04 20:49   回复  
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
纳米材料75310楼
2017-05-07 14:49   回复  
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
gengxin6012楼
2017-05-09 20:39   回复  
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
祝福
slytjiaofei13楼
2017-05-09 20:43   回复  
冬日曙光14楼
2017-05-09 20:48   回复  
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
6 发自小木虫Android客户端
晨曦CXL17楼
2018-02-16 08:35   回复  
nijingxuan19楼
2018-08-16 21:27   回复  
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
顶 发自小木虫Android客户端
晨曦CXL20楼
2019-03-07 14:10   回复  
合欢雨意(金币+1): 谢谢参与
a 发自小木虫Android客户端
相关版块跳转 我要订阅楼主 合欢雨意 的主题更新
201/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭