应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » DH5α
111/2返回列表12下一页
查看: 2462  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

初手

新虫 (初入文坛)

[交流] DH5α

请问大神们，使用大肠杆菌DH5α做转化，目的基因首先要连接到pUC19质粒上才能转入吗？

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-05-03 20:49:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

冰之雪域

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
初手(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-04 16:43:31
目的基因无法自己在大肠杆菌种扩增之类的，需要借助相应的载体质粒，所以目的基因首先要构建到你需要的载体质粒上

发自小木虫IOS客户端
赞一下(2人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

初手
3楼2017-05-03 20:58:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖仅楼主可见
赞一下

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

初手
2楼2017-05-03 20:51:38
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

sandyes

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 初手 at 2017-05-04 08:04:52
那么把目的基因连接到PMD19-T上可以转入DH5α这个感受态吗？
...

没有毒性的话大部分载体都能用DH5a的，特别适用于PGEX系列载体，适用于大构建
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

初手
7楼2017-05-04 16:44:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

初手

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 冰之雪域 at 2017-05-03 20:58:01
目的基因无法自己在大肠杆菌种扩增之类的，需要借助相应的载体质粒，所以目的基因首先要构建到你需要的载体质粒上

那么把目的基因连接到PMD19-T上可以转入DH5α这个感受态吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2017-05-04 08:04:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

初手

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 18853812522 at 2017-05-03 20:51:38
连接到载体上才能转入的呀

那么请问目的基因与pUC19的连接方法是怎么样啊

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2017-05-04 08:06:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

plantviro

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
初手(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-04 16:43:41
是的，必须，用连接酶把片段和载体连接上。当然你们实验室有钱可以用重组酶，也非常快。

连接第一可以看分子克隆，第二可以看takara的说明书。网站上可以下说明书
赞一下 回复此楼
学海无涯苦做舟，乐做浆
6楼2017-05-04 10:31:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

relifing

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
做转化一定是目的基因和你的质粒连接好了才能转，至于质粒就看你自己选择
赞一下 回复此楼
没有伞的孩子，那就努力奔跑吧
8楼2017-05-04 17:10:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

relifing

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 初手 at 2017-05-04 08:04:52
那么把目的基因连接到PMD19-T上可以转入DH5α这个感受态吗？
...

我刚好在做转化，用的载体是PGEX4T-1
赞一下 回复此楼
没有伞的孩子，那就努力奔跑吧
9楼2017-05-04 17:12:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

初手

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by sandyes at 2017-05-04 16:44:55
没有毒性的话大部分载体都能用DH5a的，特别适用于PGEX系列载体，适用于大构建...

好的谢谢

发自小木虫Android客户端
回复此楼
10楼2017-05-04 18:07:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 初手 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +3 gouxfjh 2026-08-28 3/150 2026-08-29 01:01 by jurkat.1640
[基金申请] 国自然评审意见 +11 wangmingqi 2026-08-28 15/750 2026-08-29 00:17 by fangyl2005
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +3 德尚中行 2026-08-27 3/150 2026-08-28 15:24 by rongshuxia
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +4 gdd2018 2026-08-28 9/450 2026-08-28 14:22 by jklily
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +3 bud_bud 2026-08-27 6/300 2026-08-28 11:53 by bud_bud
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭