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YGY930427

新虫 (初入文坛)

[求助] 亲和素修饰磁纳米,戊二醛做交联剂 已有5人参与

研一刚刚做实验,500微升氨基化Fe2O3磁纳米粒子,加入1.5ml的2.5%戊二醛PB溶液,避光反应了三四个小时,用永磁铁磁性分离,洗涤后再加亲和素,结果测紫外的时候发现戊二醛交联后的磁纳米粒子上清液和底液吸光度在200-400nm都是1以上,看不出来峰,不知道是不是因为在反应时没有一直震荡还是什么原因,可能没有交联上,有哪些小伙伴做过啊,诚挚地希望给点意见,谢谢大家了

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1974707632

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

10nm的磁响应太弱,用戊二醛容易将磁珠之间的氨基交联,形成团聚,我们后来也改用普瑞迈格400nm的氨基磁珠了,效果不错。
8楼2017-06-11 15:16:13
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SKKSING

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问你测亲和素的紫外特征吸收峰是多少?
11楼2018-03-10 21:27:40
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普通回帖

yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)


粒子浓度、大小,亲和素浓度,ph

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2楼2017-05-03 16:57:24
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YGY930427

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yubeihong at 2017-05-03 16:57:24
粒子浓度、大小,亲和素浓度,ph

一开始磁纳米粒子浓度4mg/ml,加戊二醛交联的,后取出交联后的用PB稀释了,相当于磁纳米粒子浓度变成0.5mg/ml,亲和素是0.5mg/ml,PB溶液的PH为8.0

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3楼2017-05-03 18:37:17
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)


你的粒子多大,能分离澄清吗?磁性粒子表面包覆了吗

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4楼2017-05-03 19:09:33
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YGY930427

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yubeihong at 2017-05-03 19:09:33
你的粒子多大,能分离澄清吗?磁性粒子表面包覆了吗

直径是10nm,觉着是没交联上,我的纳米粒子发生了聚集

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5楼2017-05-03 22:07:21
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)


引用回帖:
5楼: Originally posted by YGY930427 at 2017-05-03 22:07:21
直径是10nm,觉着是没交联上,我的纳米粒子发生了聚集
...

你可能氨基没修饰上,我师姐买过普瑞迈格的氨基粒子,直接用戊二醛修饰接蛋白酶可以,链霉亲和素没做过。

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6楼2017-05-03 22:13:09
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
氨基修饰以后粒径是10nm?
这个有这么小的么?之前咨询过普瑞迈格的,氨基的报价是5mL,430元(10mg/mL,200/400nm)
磁粒子包硅以后接的氨基。
7楼2017-05-04 10:00:51
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hn161101093

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by yubeihong at 2017-05-03 22:13:09
你可能氨基没修饰上,我师姐买过普瑞迈格的氨基粒子,直接用戊二醛修饰接蛋白酶可以,链霉亲和素没做过。
...

请问用戊二醛交联时需要加类似氰基硼氢化钠这样的还原剂吗?谢谢
9楼2017-09-26 15:54:51
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捐助贵宾 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by hn161101093 at 2017-09-26 15:54:51
请问用戊二醛交联时需要加类似氰基硼氢化钠这样的还原剂吗?谢谢...

请问这个问题解决了没?需要加吗?
10楼2017-10-30 01:06:36
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