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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 跪求指导HepG2 lipo3000
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新虫 (初入文坛)

[交流] 跪求指导HepG2 lipo3000 已有3人参与

用lipo3000转染HepG2,因为要测上清蛋白活性，不能使用血清，因为血清含目的蛋白，第二天换成无血清培养基培养72小时，那么问题来了
1尽管每天添加新的培养基，每次换成无血清培养基后30小时左右都死的差不多了，用optimem培养72小时会不会好一些?
2,细胞转染时密度90%,真的可以再养四天吗？每次就算用完全培养基最多72小时都不行了
求指教

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1楼 2017-05-01 19:55:40
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102337546

新虫 (初入文坛)
唉 自己给自己一个拥抱

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2楼2017-05-01 19:56:26
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科研用户

禁言 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
3楼2017-05-02 10:44:28
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102337546

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 科研用户 at 2017-05-02 10:44:28
lipo3000的毒性大，会造成细胞死亡，推荐一款英格恩生物的转染试剂，是纳米材料的，毒性很低，而且可以加血清和抗生素

不会啊 不换无血清培养基细胞根本不会死，lipo3000基本没有毒性

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4楼2017-05-03 19:25:05
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diezhang

新虫 (小有名气)
★
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为什么不用optimem啊 90%撑不住 就往前提呗 70%

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5楼2017-05-03 23:36:04
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我以前做的是RFECT Hela增殖表皮癌细胞转染，一般情况下接种后24小时内(细胞处于对数生长期)进行转染，转染前用opti—MEM洗 细胞两次，然后进行转染，转染5、6个小时后要观察细胞状态，如果有太多细胞漂起来就应该及时换成MEM，因为我们用的更多的还是在接种时就用这种无血清培养基。
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6楼2019-04-09 16:35:59
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