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新虫 (小有名气)

[交流] 求引物配对形成粘性末端方法

大家好,我想改造质粒。在原来的两个酶切位点之间引入一个新的酶切位点,打算用两个短引物25bp,32bp互相退火形成跟双酶切载体后的两个粘末端一样,这样可操作吗?
如果可行,求具体的实验方法。
另外,两条引物需要5端磷酸化吗?

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