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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » GST pull down 实验中GST融合蛋白是不是必须得纯化出来？
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John_Chia

新虫 (初入文坛)

[求助] GST pull down 实验中GST融合蛋白是不是必须得纯化出来？ 已有1人参与

如果纯化出来了，溶液里面有GSH。再加入beads是不是会影响与GST融合蛋白的结合？该怎么解决？

@hc-material 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2017-04-26 10:29:27
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潇潇暮雨1900

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

朋友您好，缘分，我前两天也是很纠结这个问题，后来硬着头皮做了一次，发现是可以解决的，只要把纯出来的蛋白做一定的稀释，就不影响它重新挂柱，我试了稀释1/100（就是1ml pulldown体系，最多一次加了100ul纯好的蛋白-含有10mM GSH），发现结合的挺好。希望对你有帮助，祝好运。
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2楼2017-07-03 15:05:49
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鱼的sky

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 潇潇暮雨1900 at 2017-07-03 15:05:49
朋友您好，缘分，我前两天也是很纠结这个问题，后来硬着头皮做了一次，发现是可以解决的，只要把纯出来的蛋白做一定的稀释，就不影响它重新挂柱，我试了稀释1/100（就是1ml pulldown体系，最多一次加了100ul纯好的蛋 ...

请问您做GST Pull  Down 的蛋白纯化后要透析吗

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3楼2018-03-30 13:22:11
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