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哈哈11111111

新虫 (初入文坛)

[求助] 引物特异性 已有1人参与

怎么才可以知道正在用的引物特异性怎么样呢?总是扩不出来,所以不知道是引物问题还是体系问题

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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)


哈哈11111111(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-26 16:37:18
如果觉得是引物问题,就多设计几对,提高退火温度可以提高特异性,降低退火温度可以提高p出来的几率。体系你可以用2x的pcr  mix,引物用10微摩的加1微升,模板根据你的起始浓度加,1到5微升,其余的加水补足就可以,体系用体积25或50

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2楼2017-04-25 15:49:44
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
3楼2017-04-26 12:49:03
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匿名

用户注销 (正式写手)

★ ★
哈哈11111111(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-04-26 16:37:31
本帖仅楼主可见
4楼2017-04-26 12:53:25
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bestzdz

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
去Blast搜索,非常有效
学海无涯,乐在其中;谨言慎行,惜时自勉!
5楼2017-04-26 16:38:08
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