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changfish

[交流] PCR产物条带异常

这几天做了几次PCR产物凝胶电泳,发现所出现的条带不在我预期的900bp左右,而是在500到750bp之间, 在点样孔里还发现了一些整齐的,很亮的,貌似条带的东西。再看几天前的图谱条带都在900bp左右(用的引物相同只是模板不一样)。请教各位高手这其中的原因是什么?会不会是模板的问题呢?
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

tag酶用保真性好一点的,可以扩增长片段的最好了,比如longtaq,pfu等等好多呢
或者可能是模板的序列是富含GC的,这就要优化一下反应体系,加入一些增加PCR特异性的物质如DMSO;还有可能就是你的模板不纯,影响了扩增的效率
会当凌绝顶,一览众山小
2楼2009-01-05 19:43:56
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