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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 用赛默飞的T4连接酶连接目的基因和载体一直连接不上，求大神指点
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0220zy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by diezhang at 2017-05-03 15:10:03
marker是线性的 质粒是环状的 你的算法不靠谱

那应该怎么算呢？求大神指教

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11楼2017-05-03 17:45:53
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diezhang

新虫 (小有名气)
想省事的话拿空载体做对照 比空载体大说明有可能插入了目的基因 片段太小的话这个方法比不出来

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12楼2017-05-03 19:02:08
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diezhang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 0220zy at 2017-05-03 17:45:53
那应该怎么算呢？求大神指教
...

连接后转化挑斑鉴定  连接后没跑过胶啊

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13楼2017-05-03 19:08:49
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qazwsxmmi

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

酶切成功了吗？如果酶切没有成功的话是连不上的。还有就是酶切位点是否一致。
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努力才是最真的
14楼2017-08-06 14:43:51
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hzau103

新虫 (正式写手)
用一步克隆试剂盒啊

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15楼2017-08-06 14:56:34
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