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新虫 (小有名气)

[交流] 毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照峰分裂,求解答

色谱条件:Discovery C18柱,乙腈,水梯度洗脱,紫外波长266nm,进样量20ul
问题:我用了同一型号的两根柱子,同样的流动相,同样的梯度,同一台液相,进毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照溶液(浓度0.01mg/ml),其中一根色谱柱(此处称该柱子为色谱柱1)的图谱在34min左右出峰,另一根色谱柱在27min和34min两个地方出峰,34分钟的峰面积为色谱柱1的毛苷峰面积的一半,请问这是怎能回事?同一种物质为什么会分为两个峰?

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新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lrk19881110 at 2017-04-21 13:15:45
首先需要排除27分钟那个峰是否为柱子里面的残留,二是考虑样品污染,三是考虑你对照溶液的稳定性

同样的对照,换了另一根C18柱,没有分离,且此对照做过稳定性考察,三个月内稳定,这次做了在有效期,说明的对照没问题。如果是柱内残留,那应该是不影响对照峰面积,只是多了一个峰,可是,我做的是对照峰峰面积减少了一半以上

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7楼2017-04-22 21:42:22
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2楼2017-04-19 19:02:41
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匿名

禁虫 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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3楼2017-04-20 05:32:56
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新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by shen2003 at 2017-04-20 05:32:56
你可以把柱子反过来走一针试试

反用就可以么?为什么?

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4楼2017-04-20 22:40:21
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