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15369305066

新虫 (初入文坛)

[求助] 尿酸酶在配置是用什么溶剂 已有1人参与

在网上查到资料称,尿酸酶在测活时,用含有0.001%曲拉通X-100和1mM EDTA的50mM硼酸缓冲液(PH8.5)溶解冻干粉
性,但是具体怎么配制上述溶液,请大神赐教
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心熙今

铁虫 (初入文坛)

尿酸酶活性测定方法
主要试剂
a) 硼酸缓冲液储备液(20 mmol/L EDTA,0.02% Triton-X100,pH8.5 1 mol/L硼酸缓冲液)
称取硼酸6.185 g,硼砂9.535 g,EDTA 1.169 g,10% Triton X-100 400 μL,ddH2O定容到200 mL。
b) 尿酸稀释液(1 mmol/L EDTA,0.001% Triton X-100,pH8.5 50 mmol/L硼酸缓冲液)
取硼酸缓冲液储备液8 mL加入ddH2O 152 mL,检测pH=8.5。 c) 尿酸酶工作溶液储备液(0.01% 尿酸,1 mmol/L EDTA,0.001% Triton X-100,pH8.5 50 mmol/L硼酸缓冲液,用棕色瓶冷冻保存)
准确称取10 mg尿酸溶解于稀释液中,并准确定容至100 mL,此溶液作为储备液保准于4℃,测定活性时用相同缓冲液稀释10倍使用。 d) 尿酸酶酶活测定工作液(0.001%尿酸,1 mmol/L EDTA,0.001% Triton X-100,pH8.5 50 mmol/L硼酸缓冲液,用棕色瓶冷冻保存)
将尿酸酶工作溶液储备液稀释10倍即得。

酶活性测定过程
先加入2 mL尿酸溶液和0.5 mL ddH2O于试管中,于40℃水浴中保温5 min。加入0.5 mL适当稀释的酶液到试管中,准确反应5 min后,加入0.2 mL 20% KOH终止反应。根据尿酸于290 nm处的特征吸收,测定尿酸被尿酸酶氧化生成尿囊素后,剩余尿酸在290 nm处吸光值。空白管则先加入KOH,再加入酶液,立即混匀,读取290 nm处吸光值。
2楼2017-05-24 10:33:56
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15369305066

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 心熙今 at 2017-05-24 10:33:56
尿酸酶活性测定方法
主要试剂
a) 硼酸缓冲液储备液(20 mmol/L EDTA,0.02% Triton-X100,pH8.5 1 mol/L硼酸缓冲液)
称取硼酸6.185 g,硼砂9.535 g,EDTA 1.169 g,10% Triton X-100 400 μL,ddH2O定容到200 m ...

我只想要溶解尿酸酶 也是要用上述测活时的溶剂吗?
3楼2017-12-26 09:54:23
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好奇害死猫

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 15369305066 at 2017-12-26 09:54:23
我只想要溶解尿酸酶 也是要用上述测活时的溶剂吗?
...

你好,我也想问配置时直接用缓冲液溶解吗?

发自小木虫IOS客户端
4楼2019-09-23 00:24:38
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