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尿酸酶在配置是用什么溶剂 已有1人参与
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在网上查到资料称，尿酸酶在测活时，用含有0.001%曲拉通X-100和1mM EDTA的50mM硼酸缓冲液（PH8.5）溶解冻干粉 性，但是具体怎么配制上述溶液，请大神赐教  |
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尿酸酶活性测定方法 主要试剂 a) 硼酸缓冲液储备液(20 mmol/L EDTA，0.02% Triton-X100，pH8.5 1 mol/L硼酸缓冲液) 称取硼酸6.185 g，硼砂9.535 g，EDTA 1.169 g，10％ Triton X-100 400 μL，ddH2O定容到200 mL。 b) 尿酸稀释液(1 mmol/L EDTA，0.001% Triton X-100，pH8.5 50 mmol/L硼酸缓冲液) 取硼酸缓冲液储备液8 mL加入ddH2O 152 mL，检测pH=8.5。 c) 尿酸酶工作溶液储备液(0.01% 尿酸，1 mmol/L EDTA，0.001% Triton X-100，pH8.5 50 mmol/L硼酸缓冲液，用棕色瓶冷冻保存) 准确称取10 mg尿酸溶解于稀释液中，并准确定容至100 mL，此溶液作为储备液保准于4℃，测定活性时用相同缓冲液稀释10倍使用。 d) 尿酸酶酶活测定工作液(0.001%尿酸，1 mmol/L EDTA，0.001% Triton X-100，pH8.5 50 mmol/L硼酸缓冲液，用棕色瓶冷冻保存) 将尿酸酶工作溶液储备液稀释10倍即得。 酶活性测定过程 先加入2 mL尿酸溶液和0.5 mL ddH2O于试管中，于40℃水浴中保温5 min。加入0.5 mL适当稀释的酶液到试管中，准确反应5 min后，加入0.2 mL 20% KOH终止反应。根据尿酸于290 nm处的特征吸收，测定尿酸被尿酸酶氧化生成尿囊素后，剩余尿酸在290 nm处吸光值。空白管则先加入KOH，再加入酶液，立即混匀，读取290 nm处吸光值。 |
2楼2017-05-24 10:33:56
3楼2017-12-26 09:54:23
4楼2019-09-23 00:24:38