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涂涂36

新虫 (初入文坛)

[交流] FITC标记抗体荧光弱 已有2人参与

各位大神,请问用FITC标记抗体荧光比较弱,有哪些可能影响的因素啊?有啥建议呢?还有FITC的反应基团除了-N=C=S,看见有公司卖反应基团是-NHS的FITC,有人使用过D大神,标记效果哪个更加好点呢?跪求指点!
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冷香shine

新虫 (初入文坛)


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你好,楼主,我最近也在做异硫氰酸荧光素,也遇到了相关问题,不知楼主可解决了??

发自小木虫Android客户端
2楼2017-05-02 11:01:33
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涂涂36

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 冷香shine at 2017-05-02 11:01:33
你好,楼主,我最近也在做异硫氰酸荧光素,也遇到了相关问题,不知楼主可解决了??

没有呢,焦急中。。

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3楼2017-05-02 13:59:11
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冷香shine

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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3楼: Originally posted by 涂涂36 at 2017-05-02 13:59:11
没有呢,焦急中。。...

我在做异硫氰酸荧光素标记壳聚糖,不同的溶剂,不同的PH值,现象都不一样,而且透析时间也挺久的,也不知道哪种方法合理

发自小木虫Android客户端
4楼2017-05-02 14:45:57
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荧光助手

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
在抗体标记,可以用荧光强度更好的藻红蛋白(R-PE)试试,吸光度和荧光量子产率高,荧光强灵敏度高,荧光背景小,有国产的质量也很好价格也不贵。

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5楼2017-05-23 10:20:07
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涂涂36

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:
5楼: Originally posted by 荧光助手 at 2017-05-23 10:20:07
在抗体标记,可以用荧光强度更好的藻红蛋白(R-PE)试试,吸光度和荧光量子产率高,荧光强灵敏度高,荧光背景小,有国产的质量也很好价格也不贵。

非常感谢!藻红蛋白(R-PE)标记的时候会出现空间位阻大的问题,不知是否有相应的解决方法呢?谢谢!

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6楼2017-05-23 16:14:39
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荧光助手

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 涂涂36 at 2017-05-23 16:14:39
非常感谢!藻红蛋白(R-PE)标记的时候会出现空间位阻大的问题,不知是否有相应的解决方法呢?谢谢!...

如果做单抗的多色标记,由于R-PE为大分子蛋白,才会考虑空间位阻的影响。也可考虑将R-PE不直接标记在单抗上,而是标记到二抗上,或则采用BAS亲和标记,可获得更高的灵敏度。
7楼2017-05-24 12:02:20
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涂涂36

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 荧光助手 at 2017-05-24 12:02:20
如果做单抗的多色标记,由于R-PE为大分子蛋白,才会考虑空间位阻的影响。也可考虑将R-PE不直接标记在单抗上,而是标记到二抗上,或则采用BAS亲和标记,可获得更高的灵敏度。...

谢谢!
8楼2017-06-12 14:07:06
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