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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫实验 » FITC标记抗体荧光弱
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涂涂36

新虫 (初入文坛)

[交流] FITC标记抗体荧光弱 已有2人参与

各位大神，请问用FITC标记抗体荧光比较弱，有哪些可能影响的因素啊？有啥建议呢？还有FITC的反应基团除了-N=C=S,看见有公司卖反应基团是-NHS的FITC,有人使用过D大神，标记效果哪个更加好点呢？跪求指点!
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1楼 2017-04-17 16:12:22
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冷香shine

新虫 (初入文坛)
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你好，楼主，我最近也在做异硫氰酸荧光素，也遇到了相关问题，不知楼主可解决了？？

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2楼2017-05-02 11:01:33
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涂涂36

新虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by 冷香shine at 2017-05-02 11:01:33
你好，楼主，我最近也在做异硫氰酸荧光素，也遇到了相关问题，不知楼主可解决了？？

没有呢，焦急中。。
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冷香shine
3楼2017-05-02 13:59:11
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冷香shine

新虫 (初入文坛)
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3楼: Originally posted by 涂涂36 at 2017-05-02 13:59:11
没有呢，焦急中。。...

我在做异硫氰酸荧光素标记壳聚糖，不同的溶剂，不同的PH值，现象都不一样，而且透析时间也挺久的，也不知道哪种方法合理

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4楼2017-05-02 14:45:57
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荧光助手

新虫 (初入文坛)
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在抗体标记，可以用荧光强度更好的藻红蛋白（R-PE）试试，吸光度和荧光量子产率高，荧光强灵敏度高，荧光背景小，有国产的质量也很好价格也不贵。
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涂涂36
5楼2017-05-23 10:20:07
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涂涂36

新虫 (初入文坛)
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5楼: Originally posted by 荧光助手 at 2017-05-23 10:20:07
在抗体标记，可以用荧光强度更好的藻红蛋白（R-PE）试试，吸光度和荧光量子产率高，荧光强灵敏度高，荧光背景小，有国产的质量也很好价格也不贵。

非常感谢！藻红蛋白（R-PE）标记的时候会出现空间位阻大的问题，不知是否有相应的解决方法呢？谢谢！
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荧光助手
6楼2017-05-23 16:14:39
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荧光助手

新虫 (初入文坛)
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6楼: Originally posted by 涂涂36 at 2017-05-23 16:14:39
非常感谢！藻红蛋白（R-PE）标记的时候会出现空间位阻大的问题，不知是否有相应的解决方法呢？谢谢！...

如果做单抗的多色标记，由于R-PE为大分子蛋白，才会考虑空间位阻的影响。也可考虑将R-PE不直接标记在单抗上，而是标记到二抗上，或则采用BAS亲和标记，可获得更高的灵敏度。
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7楼2017-05-24 12:02:20
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涂涂36

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 荧光助手 at 2017-05-24 12:02:20
如果做单抗的多色标记，由于R-PE为大分子蛋白，才会考虑空间位阻的影响。也可考虑将R-PE不直接标记在单抗上，而是标记到二抗上，或则采用BAS亲和标记，可获得更高的灵敏度。...

谢谢！
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8楼2017-06-12 14:07:06
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