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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 制作BL21老是做不出来
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上弦月fh

新虫 (初入文坛)

[求助] 制作BL21老是做不出来 已有2人参与

实验室里每个人都做了一遍，就是做不出来，验证过菌种没有问题，但每次涂平板，涂卡那的平板就是会长。另外，在试管里活化的时候，菌能长，但扩大培养的时候，不管怎么样就是不长（培养基是LB不加卡那），求大神指教支招
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1楼 2017-04-17 09:16:37
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sshangc

新虫 (初入文坛)
注意检查一下抗生素的浓度啊
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2楼2017-04-18 11:12:36
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lusandanooo

银虫 (小有名气)
意思就是加了卡那才长，不加就不长？

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毕了业真开心嘻嘻嘻嘻嘻
3楼2017-04-18 14:53:28
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沧海桑田田田

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
为什么扩大培养的时候不加kam了？扩大培养的温度是多少？

发自小木虫IOS客户端
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4楼2017-04-20 08:43:40
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夏日风静

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

扩大培养必须加卡那霉素，否则不利于质粒的生成，那样的话质粒丢失，实验白做了
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5楼2017-04-20 20:53:10
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上弦月fh

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lusandanooo at 2017-04-18 14:53:28
意思就是加了卡那才长，不加就不长？

是要不加卡那的长，加卡那的不长
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6楼2017-04-24 21:25:22
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上弦月fh

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 沧海桑田田田 at 2017-04-20 08:43:40
为什么扩大培养的时候不加kam了？扩大培养的温度是多少？

要做感受态细胞，扩大培养是为了收集菌体，活化和扩大都是不加抗生素的
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7楼2017-04-24 21:26:46
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