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新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
电转化效率高一些,可以检测一下有没有酶活力
11楼2017-04-19 08:26:24
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钟颖小确幸

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我做了,感觉转化效率挺高的
12楼2017-04-20 15:44:56
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13楼2017-04-20 15:48:09
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一尾潜水的鱼

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by Romanticman at 2017-04-18 00:33:26
这个没有做过,我们有做酵母双杂交实验,过程和你的相似,阳性鉴定时如果有阳性,测序又不正确,很有可能是假阳性,建议阳性鉴定采用混合引物
...

你好,我正在做酵母双杂,也有出现这种情况,想请教你。
就是带有目的基因的质粒转化到酵母中,用特异引物做 pcr可以检测到条带,但是反过来检测该纯质粒时,发现怎么也检测不出来条带,不知道什么原因,,,已经转进目的基因的酵母,对它提质粒,可以检测到目的条带吗?
14楼2017-05-07 15:34:04
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Romanticman

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by 曾小旭 at 2017-04-18 00:39:15
谢谢这么晚了回帖!我载体引物和特异性引物都用了,理论上来说,pcr有条带就差不多是正确的,可是提质粒,用质粒测序失败,所以很纠结到底有没有转进去。今天挑了100多个菌落重新pcr,同样还是有目的条带的,打算拿 ...

为什么不送菌液测序呢?

发自小木虫Android客户端
15楼2017-05-08 17:13:08
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270782719

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
酶切后不要用胶回收,得率低,可采乙酸钠加醇析出

发自小木虫Android客户端
16楼2017-05-21 07:08:18
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荣rong006

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 曾小旭 at 2017-04-18 00:30:08
在酵母中表达一种酶,做酶的功能
...

我也要在酵母中表达一种酶,做酶的催化功能。你转酵母的质粒线性化问题解决了吗?我也遇到线性化质粒浓度低的问题
17楼2019-08-12 10:23:12
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tomment

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
您好,我需要pPICZaA质粒,可否馈赠,购买也行。
18楼2019-11-15 20:36:53
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