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曾小旭

新虫 (初入文坛)

[交流] 酵母转化

做了一两个月了,酵母转化一直不成功,请做过相关实验的小伙伴给点建议!!!
    我的载体是pPICZaA,酵母菌株是GS115,用SacI酶切质粒线性化,用的10x 的体系(质粒共10ug),酶切后纯化得到质粒,再转化到GS115中,可是问题是酶切后的质粒浓度很低,还不到100ng/ul,转化要求加入5-10ug 质粒!哪位朋友可以给点意见,非常感谢

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tomment

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
您好,我需要pPICZaA质粒,可否馈赠,购买也行。
18楼2019-11-15 20:36:53
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曾小旭

新虫 (初入文坛)

转化没有电转移,用的是Licl转化法

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2楼2017-04-16 23:34:02
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choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-07 22:23:01
可以考虑换个菌种,有的菌种跟转进去的质粒不兼容,导致一个细胞内质粒拷贝数少。还有是不是质粒太大,转进去难度大

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3楼2017-04-17 00:20:50
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张凡云

至尊木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不是醋酸锂法转化吗?对了,采用电转转化效率会更高

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4楼2017-04-17 07:27:43
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