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mulinxz

新虫 (小有名气)

[求助] 求质粒DNA浓缩纯化的方法 已有3人参与

用试剂盒提取的质粒浓度太低,纯度也达不到测序要求,求大神给个方法,详细点!谢谢!

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原来,是这样

金虫 (小有名气)

不要怪试剂盒的问题,你自己的菌浓度,裂解时间,上清量是否都做的很好。不管国产还是进口,质粒提取试剂盒效率都还行的,只可能是你过柱前几步有问题的。

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6楼2017-04-11 21:27:53
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禾子萱

新虫 (初入文坛)

BBI的SanPrep柱式质粒抽提试剂盒就很好用。菌液量不要太多,加入试剂颠倒混匀时不要太剧烈一般都没问题吧

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7楼2017-04-11 23:06:43
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idealgas

新虫 (小有名气)

浓缩?加2倍体积异丙醇,和dna mate(以前宝生物一个试剂盒里的产品),3m 醋酸钠10—50ul,轻轻颠倒混匀,4度离心15min,70%乙醇洗沉淀1次,晾干,适当体积回溶

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8楼2017-04-12 09:54:50
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)


2楼2017-04-11 13:53:35
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mulinxz

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yubeihong at 2017-04-11 13:53:35
你买的试剂盒不好

刚开始用国产的,换成omega也一样!

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3楼2017-04-11 13:55:17
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蕭堅

新虫 (正式写手)

就用老办法,碱裂解法提取质粒

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4楼2017-04-11 14:11:32
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

冷冻干燥可以浓缩,但是你也确定一下你构建的质粒是否有问题

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5楼2017-04-11 16:39:26
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bonbonzd

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一次提取多管,然后最后合并成一管过膜
9楼2017-04-12 12:55:22
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zjsuiyuan

新虫 (初入文坛)

简单啊,一次性多提几管啊

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10楼2017-04-14 08:01:21
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