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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 切胶回收总是失败…
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小忠忠么么

铜虫 (初入文坛)

[求助] 切胶回收总是失败… 已有3人参与

求解

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1楼 2017-04-06 22:39:58
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小苹果apple

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
加大胶回收的体系，胶回收时用试剂盒最后一步推荐的最低量去溶解
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10楼2017-04-07 16:24:44
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千乐乐千

新虫 (初入文坛)
我们实验室一般用100ul的PCR产物做胶回收，如果量太少了是回收不回来的

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11楼2017-04-07 16:35:13
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平庸or优秀

新虫 (初入文坛)
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1楼: Originally posted by 小忠忠么么 at 2017-04-06 22:39:58
求解

你回收的是什么，pcr扩增出来的目的片段么？

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2楼2017-04-07 08:07:00
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小忠忠么么

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 平庸or优秀 at 2017-04-07 08:07:00
你回收的是什么，pcr扩增出来的目的片段么？
...

是的。前面直接pcr反应液回收也不行，测序一定要切胶吗。

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3楼2017-04-07 08:08:05
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平庸or优秀

新虫 (初入文坛)
片段多大呀

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4楼2017-04-07 08:12:11
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平庸or优秀

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小忠忠么么 at 2017-04-07 08:08:05
是的。前面直接pcr反应液回收也不行，测序一定要切胶吗。
...

是回收浓度很低么？你把你的问题讲清楚

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5楼2017-04-07 08:13:54
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小忠忠么么

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 平庸or优秀 at 2017-04-07 08:12:11
片段多大呀

1400bp

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6楼2017-04-07 08:36:29
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小忠忠么么

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 平庸or优秀 at 2017-04-07 08:13:54
是回收浓度很低么？你把你的问题讲清楚
...

没有测浓度，但是我只用一管回收，50ul点了5个孔，会不会空白胶太多了

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7楼2017-04-07 08:37:47
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小忠忠么么

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 平庸or优秀 at 2017-04-07 08:13:54
是回收浓度很低么？你把你的问题讲清楚
...

做了3次，pcr产物条带都有，就是回收不了

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8楼2017-04-07 08:38:25
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小忠忠么么

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 平庸or优秀 at 2017-04-07 08:12:11
片段多大呀

我用的是tbe不是tae，会有影响吗

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9楼2017-04-07 08:38:55
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