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电泳拖带 已有1人参与
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我跑的电泳图感觉总是拖带，用的条件是0.8%的琼脂糖凝胶，110V，400MA跑30分钟，求各位大神指点一下 发自小木虫Android客户端 |
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意孤城_
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2楼2017-04-05 18:48:50
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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1：样品浓度过高。这种情况稀释一下就行了。提质粒的时候常出现这种情况。 2：蛋白杂质阻碍DNA的泳动。提基因组DNA时常出现这种情况。 以上两种情况，拖尾都是在电泳条带的后面。 3：样品破碎或是被降解 4：存在RNA 这两种情况，拖尾都是在电泳条带的前面。 PCR产物电泳拖尾，主要从以下两个方面考虑： 1、PCR产物自身原因： 往往由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多，而造成PCR的非特异性产物过多。 对策：①减少Taq酶的量，或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③适当降低Mg2+浓度。④增加模板量，减少引物的用量，减少循环次数，提高退火温度。 2、电泳体系的问题： （1）电泳缓冲液TAE或者TBE的污染，建议更换缓冲液。（2）上样时样品漂了，建议增加上样缓冲液的用量，以及小心加样。（3）电压太高。（4）适当把你的胶的浓度加大。（根据你的片断大小而定）（5）观察你的marker是否也存在拖尾现象，作为对照。 |
3楼2017-04-06 22:33:19