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xujing_1018铜虫 (小有名气)
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[交流]
求如何构建原始种子库
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| 我们有一个质粒要做新药，是大肠杆菌进行扩增的，根据《预防用DNA疫苗临床前研究技术指导原则》，需要建立菌种库：对转化大肠杆菌的条件进行优化。建立原始种子库。对种子库的遗传稳定性进行分析，要明确该种子库可以传代的次数。在此基础上建立主细胞库和工作细胞库，并应保证该类细胞库无噬菌体和其它外源因子的污染；并对细菌的遗传背景进行分析和检测，保证细胞库中细菌的遗传背景包括染色体组型、表型未发生改变；应检测细菌的形态学，保证细菌的均一性；应检测导入基因的存在状态。并对工作细胞库的规模、保存条件、扩增条件、传代过程中质粒的稳定性（拷贝数及表达量）、允许的传代次数等进行研究。最近查了不少资料，没有得出正确的有关建立种子库的信息。 |
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