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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细菌破碎问题求助，急
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chuxin7072

金虫 (小有名气)

[交流] 细菌破碎问题求助，急

我用的表达菌是大肠杆菌BL21(DE3)PLYS，使用超声波破碎时发现有时很难破碎，而有时却很容易，请问各位碰到过类似的情况吗？原因？
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1楼 2008-12-31 15:06:57
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jasco

木虫 (正式写手)
很难？不会啊。
是不是菌体有自溶，核酸出来会使得菌体变得很黏，但是多超几分钟就好了
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2楼2008-12-31 15:57:25
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pinene3862

银虫 (正式写手)
★
amisking(金币+1,VIP+0):欢迎发帖交流，给个红包鼓励一下！ 5-29 12:12
加一点溶菌酶，冰上放一会儿。如果粘稠，用benzonase (Novagen)处理一下，很灵的
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3楼2008-12-31 18:29:16
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3046261929708

铜虫 (小有名气)
大肠杆菌短小芽孢杆菌也有可能
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你若先走了，回头时就不要怪我背对着你！
4楼2008-12-31 20:55:19
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蓝色基因

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by pinene3862 at 2008-12-31 18:29:
加一点溶菌酶，冰上放一会儿。如果粘稠，用benzonase (Novagen)处理一下，很灵的

加了溶菌酶，是放冰上吗？我们这边都是室温裂解30分钟。
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5楼2009-01-01 11:12:02
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charon1982

铁杆木虫 (著名写手)
★
amisking(金币+1,VIP+0):欢迎发帖交流，给个红包鼓励一下！ 5-29 12:12
控制菌体生长时间，不要长老了，阴性菌不应该难提的啊，加溶菌酶37度处理，溶菌酶的最适温度是37度，一个小时差不多
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帮助虫友，提升自己
6楼2009-01-01 13:38:59
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speculiar

银虫 (小有名气)
我用超声破胞也有类似的情况，所以后来都是用溶菌酶破胞的，保险点
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7楼2009-01-01 16:35:54
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youxiaoo

金虫 (初入文坛)
加了溶菌酶，是放冰上吗？我们这边都是室温裂解30分钟。 [/quote]
超声破菌仪
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8楼2009-01-03 10:08:25
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youxiaoo

金虫 (初入文坛)
超声破菌，加溶菌酶，并放在冰上
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9楼2009-01-03 10:09:24
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baiyidao

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
溶菌酶后放入37后温育1h
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10楼2009-05-29 11:27:52
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