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vicky921121

新虫 (初入文坛)

[交流] western blot转膜蛋白不见了 已有3人参与

电转300mA,100分钟,确定正负没反(黑胶白膜,电转槽内是黑对黑,白对红),电转液也是新鲜配制(含20%甲醇),可是不管是胶、膜,甚至是滤纸上都没有蛋白条带,marker也不见了……请教各位老师,这是什么原因呢?谢谢~

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medi812

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个好诡异 一开始第一感觉就是跑出去了 但是滤纸上也没有就诡异了 会不会时间太长 连滤纸也跑过去了?我们用的biorad的电转 自己配的溶液 最长也就60min 而且电流是1.0 经常能看到marker跑到滤纸上 但是还是能在膜上看到marker 会不会你的胶和膜压制的时候有点问题?

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2楼2017-04-03 21:34:38
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vicky921121

新虫 (初入文坛)

同样的方法又重跑了一次又出来了

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3楼2017-04-04 17:57:17
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18763893761

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by medi812 at 2017-04-03 21:34:38
这个好诡异 一开始第一感觉就是跑出去了 但是滤纸上也没有就诡异了 会不会时间太长 连滤纸也跑过去了?我们用的biorad的电转 自己配的溶液 最长也就60min 而且电流是1.0 经常能看到marker跑到滤纸上 但是还是能在膜 ...

我用69V转2小时,能看到marker转上了。可是仍然出不来目的条带是怎么回事呢
4楼2017-05-08 14:15:08
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gxx2lm

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 18763893761 at 2017-05-08 14:15:08
我用69V转2小时,能看到marker转上了。可是仍然出不来目的条带是怎么回事呢...

把转完膜后的胶做考染看看转膜效率

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5楼2017-05-08 22:19:04
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