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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助:基因枪轰击洋葱表皮细胞的具体方法
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trh

铜虫 (小有名气)

[交流] 求助:基因枪轰击洋葱表皮细胞的具体方法

求助基因枪轰击洋葱表皮细胞的具体方法,最好有详细的步骤,所需质粒的浓度和量.急!急!谢谢

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-18 at 10:20 ]
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1楼 2008-12-31 10:44:09
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
trh(金币+8,VIP+0):还能更详细些吗，洋葱表皮细胞需要处理吗，
3 μg 重组
质粒DNA与6 μl 50 mg·ml
-1
的金粉悬液（直径为 1.0
μm） 、4  μl 0.1 mol·L-1
亚精胺（抽滤灭菌） 、6  μl 2.5 mol·L-1
CaCl2 涡旋震荡混匀， 冰上静置 15 min， 12 000
r/min 离心10 s，收集金粉沉淀，20 μl无水乙醇重悬金
粉-DNA混合物。
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2楼2008-12-31 12:11:19
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trh

铜虫 (小有名气)
还能更详细些吗，洋葱表皮细胞需要处理吗，
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3楼2008-12-31 14:03:37
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崔红利

新虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
trh(金币+10,VIP+0): 5-10 22:36
剩下的各种参数都不是一定的，得自己去优化，还有一定不要忘记去做对照，包括没子弹的还有空子弹的！
赞一下(4人) 回复此楼
4楼2009-02-26 10:16:45
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
trh(金币+12,VIP+0): 5-10 22:36
洋葱表皮不用处理
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2009-02-26 10:45:10
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