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angelinalulu

铜虫 (初入文坛)

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[交流] PCR之后电泳检测一个条带也没有，急……

求助啊！！！
做植物PAPD
PCR之后电泳检测一个条带也没有，急……
94 ℃预变性8 min，变性94 ℃，1 min；退火38 ℃，1 min；延伸72 ℃，1.5 min

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各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧已经有5人回复

1楼 2008-12-31 09:15:41

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fleugen

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★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

你这退火温度也太低了吧，一般都55度左右，个人意见
还有PCR这个东西很讲不清的，我曾经就是同样的条件、同样的体系，有的时候P能P出来，有的时候死活就是P不出来

赞一下(1人)

7楼2009-06-22 15:36:15

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cjl2008bio

铜虫 (初入文坛)

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★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~

变性跟退火35秒够了吧，延伸的话1分钟应该也够了。
其实条件不是主要的，关键是taq酶的活性和缓冲体系，换管新的酶和缓冲液试试看，不行在考虑引物和模板的原因

赞一下(10人)

2楼2008-12-31 10:31:49

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angelinalulu

铜虫 (初入文坛)

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专业: 药学

谢谢！我再试试！有问题再请教

3楼2008-12-31 10:48:09

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llzzll2001

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先排除电泳问题。如果MARKER也没条带那就有可能是电泳的问题了

4楼2008-12-31 17:22:09

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