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putaosong

金虫 (小有名气)

[求助] 如何提高色谱峰分离度

各位大神们,我最近做一个中药的指纹图谱,发现其中有5个色谱峰分离度太低(出峰时间为40.924---45.335这5个峰),色谱柱:Agilent Zorbax SB-C18(4.6mm×250mm, 5m,100 Å;流动相:A:1%乙酸水,B:甲醇;流速:1.0 mL/min;检测波长:254 nm;柱温:30 ℃;洗脱方法:0-25 min 15%B;25-30 min 15%-30%B; 30-50 min 30%-45%B;50-55 min 45%B;55-85 min 45%B-100%B;85-95 min 100%B;后运行10 min;色谱图如下所示:
领导让把这5个峰都达到分离度大于1.5,我通过拉长时间,5个色谱峰变为4个;降低流动相比例,5个色谱峰变为4个;降低流速,5个色谱峰变成4个;降低柱温,5个色谱峰变成4个;
求各位大神给点建议吧,不胜感激!!

如何提高色谱峰分离度
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