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putaosong

金虫 (小有名气)

[求助] 提高色谱峰分离度 已有1人参与

各位大神们,我最近做一个中药的指纹图谱,发现其中有5个色谱峰分离度太低,色谱柱:Agilent Zorbax SB-C18(4.6mm×250mm, 5m,100 Å;流动相:A:1%乙酸水,B:甲醇;流速:1.0 mL/min;检测波长:254 nm;柱温:30 ℃;洗脱方法:0-25 min 15%B;25-30 min 15%-30%B; 30-50 min 30%-45%B;50-55 min 45%B;55-85 min 45%B-100%B;85-95 min 100%B;后运行10 min;色谱图如下所示:
拉长时间,5个色谱峰变为4个;降低流动相比例,5个色谱峰变为4个;降低流速,5个色谱峰变成4个;降低柱温,5个色谱峰变成4个;
求各位大神给点建议吧,不胜感激!!

提高色谱峰分离度
IMG_2111.JPG
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我不生气,不代表我不伤心,我不哭,不代表我不心痛……
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michaelye1800

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你这种情况将梯度调缓对分离度并没有帮助,增强保留已不起作用,现可考虑减小峰宽来提高分离度,可以考虑在有机相添加一些乙腈改变下化合物的选择性
2楼2017-04-05 15:44:07
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