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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » -80度保存的质粒失活怎么办
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二战必胜

新虫 (初入文坛)

[求助] -80度保存的质粒失活怎么办 已有1人参与

-80度保存的大肠杆菌要复苏提质粒，已经平板培养，液体培养基过夜摇菌都试过，也没加抗生素试过，条件37度，200rpm12-16小时，平板长不出菌落，摇菌不浑浊，猜可能大肠杆菌已经死掉失活了，求怎么办？

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1楼 2017-03-30 10:44:37
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

mochenmi

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 二战必胜 at 2017-03-31 09:49:57
做毕设，时间都要来不及了，里面的质粒是转了特殊基因的，如果死掉的话重新连载体时间都要来不及啦。。所以最好还是能怎么拯救一下现有的啊，，
...

你保存的菌液有多少？多的话可以试试不活化直接提质粒

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6楼2017-03-31 09:59:24
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二战必胜

新虫 (初入文坛)
不过今天换了农杆菌的培养基就浑浊了原来是农杆菌的，尴尬了，谢谢大家的帮忙！

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10楼2017-04-02 12:35:56
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普通回帖

xtcao668

至尊木虫 (著名写手)
可以时间长一点

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生活的理想就是理想的生活
2楼2017-03-30 22:20:41
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mochenmi

铜虫 (小有名气)
应该是菌死掉了，条件允许的话重新转化吧。多保存几管

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3楼2017-03-30 23:34:15
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602059625

金虫 (知名作家)
所以还是保存质粒 保险

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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[url=http://ip.WoTuLa.com][img]http://i.WoTuLa.com/note.png?name=填写姓名&say=这里填写您想说的内容。[/img][/url]
4楼2017-03-30 23:39:36
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二战必胜

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mochenmi at 2017-03-30 23:34:15
应该是菌死掉了，条件允许的话重新转化吧。多保存几管

做毕设，时间都要来不及了，里面的质粒是转了特殊基因的，如果死掉的话重新连载体时间都要来不及啦。。所以最好还是能怎么拯救一下现有的啊，，

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5楼2017-03-31 09:49:57
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二战必胜

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mochenmi at 2017-03-31 09:59:24
你保存的菌液有多少？多的话可以试试不活化直接提质粒
...

不到两毫升，一小管，是不是不太多？

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7楼2017-03-31 18:08:40
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邹忌

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
二战必胜: 金币+1, ★★★很有帮助 2017-04-02 12:36:26
有没有尝试划线，可以试着培养时间延长，如果再不长的话，可能那管菌就废了！
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不是不能，只是不想
8楼2017-04-02 09:39:00
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二战必胜

新虫 (初入文坛)
尝试了涂平板，

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9楼2017-04-02 12:34:53
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